前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。
本文件由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAC/TC 76）提出并歸口。
本文件起草單位：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)。
本文件主要起草人：張麗英、龔利敏、李軍濤、楊文軍、董冰、孫永波。
1 范圍
本文件確立了畜禽飼料安全性評(píng)價(jià)中的肉雞飼養(yǎng)試驗(yàn)程序，規(guī)定了試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)、飼糧配制、試驗(yàn)實(shí)施、數(shù)據(jù)采集、統(tǒng)計(jì)分析、試驗(yàn)報(bào)告和資料存檔等階段的操作指引。
本文件適用于飼料原料、飼料添加劑安全性評(píng)價(jià)的肉雞飼養(yǎng)試驗(yàn)。
2 規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
GB 13078 飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)
NY/T 33 雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)
NY/T 388 畜禽場(chǎng)環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
NY/T 823 家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量計(jì)算方法
3 術(shù)語和定義
本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。
4 試驗(yàn)程序的構(gòu)成
肉雞飼養(yǎng)試驗(yàn)程序包括6個(gè)階段，分別為試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)、飼糧配制、試驗(yàn)實(shí)施、數(shù)據(jù)采集、統(tǒng)計(jì)分析和試驗(yàn)報(bào)告。
5 試驗(yàn)程序
5.1 試驗(yàn) 方案設(shè)計(jì)
5.1.1 試驗(yàn)方案組成
飼養(yǎng)試驗(yàn)開始前，根據(jù)受試物特性及有效劑量進(jìn)行試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)；試驗(yàn)方案包括試驗(yàn)動(dòng)物及免疫方案、試驗(yàn)分組及重復(fù)數(shù)、處理設(shè)置、飼糧配方、試驗(yàn)期、觀察與檢測(cè)和方案確認(rèn)。
5.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及免疫方案
5.1.2.1 確定試驗(yàn)動(dòng)物的信息，包括品種、日齡、性別、生產(chǎn)階段和健康狀況、動(dòng)物來源和種群規(guī)模；選擇來自于同品種（系）、同日齡、同批次、性別比例相同、體重相近的健康肉雞。
5.1.2.2 根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮鸵?，制定試?yàn)動(dòng)物免疫方案。
5.1.3 試驗(yàn)分組及重復(fù)數(shù)
遵循隨機(jī)、重復(fù)和局部控制的原則對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行分組。各試驗(yàn)組和對(duì)照組的試驗(yàn)重復(fù)數(shù)應(yīng)滿足數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析的要求。每組重復(fù)數(shù)不可少于6個(gè)，每個(gè)重復(fù)的動(dòng)物數(shù)不能少于10只。性別比例應(yīng)相同。
5.1.4 處理設(shè)置
5.1.4.1 試驗(yàn)分組
試驗(yàn)至少應(yīng)包括三個(gè)組，即對(duì)照組、有效劑量組和多倍劑量組。
5.1.4.2 試驗(yàn)劑量
試驗(yàn)劑量按以下原則確定：
a）有效劑量組應(yīng)該選用最高限量。如果沒有最高限量，應(yīng)選用最高推薦劑量。如果沒有最高推薦量，應(yīng)根據(jù)受試物的自身特性，選擇最低推薦劑量的2倍～5倍作為有效劑量；
b）多倍劑量組宜選用上述有效劑量的10倍；
c）如果受試物的耐受劑量低于有效劑量的10倍，安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)應(yīng)能通過尸檢、組織病理學(xué)以及其他適宜的試驗(yàn)方法提出反映受試物毒性的特異性指標(biāo)，并計(jì)算出受試物的安全系數(shù)。
5.1.5 飼糧配方
按照NY/T 33或相應(yīng)肉雞品種（系）飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)確定飼糧配方。對(duì)照組飼糧中通常不應(yīng)含有受試物，但對(duì)于某些動(dòng)物機(jī)體的必需營養(yǎng)素（如氨基酸、維生素、微量元素等），對(duì)照飼糧中該營養(yǎng)素水平應(yīng)低于動(dòng)物需要量，但不應(yīng)引起嚴(yán)重缺乏。
5.1.6 試驗(yàn)期
肉雞起始試驗(yàn)日齡應(yīng)為1日齡，最短試驗(yàn)期為35d。
5.1.7 觀察與檢測(cè)
5.1.7.1 臨床觀察
試驗(yàn)期內(nèi)應(yīng)每天觀察肉雞臨床表現(xiàn)、采食和飲水情況、生長情況，并詳細(xì)觀察和記錄不良反應(yīng)。對(duì)試驗(yàn)中出現(xiàn)的不明原因的死亡動(dòng)物應(yīng)進(jìn)行及時(shí)尸檢，宜進(jìn)行組織學(xué)分析。
5.1.7.2 生長性能測(cè)定
平均日采食量、平均日增重、飼料轉(zhuǎn)化率及存活率的測(cè)定和計(jì)算應(yīng)按照NY/T 823相關(guān)規(guī)定執(zhí)行，并符合以下要求：
a）平均日采食量：以重復(fù)為單位，準(zhǔn)確稱量試驗(yàn)各生長階段日糧供給量和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)剩料量，計(jì)算各重復(fù)在試驗(yàn)期內(nèi)的飼料采食量和平均日采食量；
b）平均日增重：以重復(fù)為單位，在試驗(yàn)開始和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行活體稱重，稱重前禁食12h；根據(jù)稱重結(jié)果計(jì)算各重復(fù)體增重及平均日增重；
c）飼料轉(zhuǎn)化率：以重復(fù)為單位，計(jì)算試驗(yàn)期內(nèi)各重復(fù)飼料采食量與體增重的比值；
d）育雛期存活率：以重復(fù)為單位，計(jì)算存活率。
5.1.7.3 血液學(xué)和臨床生理生化指標(biāo)檢測(cè)。
試驗(yàn)開始和試驗(yàn)結(jié)束（必要時(shí)增加試驗(yàn)中期）時(shí)，每個(gè)處理組每個(gè)重復(fù)至少隨機(jī)抽取一只體重接近平均體重的雞，性別比例相同，分別采集血樣進(jìn)行血液常規(guī)、生化指標(biāo)及其他與受試物相關(guān)的各種生理參數(shù)的檢測(cè)。
血液常規(guī)指標(biāo)主要包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）等指標(biāo)；生化指標(biāo)主要指谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TPRO）、白蛋白（ALB）、尿素氮（UN）、肌酐（CRE）、血糖（GLU）、總膽紅素（TBILI）等指標(biāo)。
5.1.7.4 組織病理學(xué)檢查
應(yīng)符合以下要求：
a）尸體解剖學(xué)檢查：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)處理組每個(gè)重復(fù)至少隨機(jī)抽取一只體重接近平均體重的雞，性別比例一致，進(jìn)行系統(tǒng)尸體解剖學(xué)檢查，為進(jìn)一步的組織學(xué)檢查提供依據(jù)；
b）臟器系數(shù)（指數(shù)）測(cè)定：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)處理組每個(gè)重復(fù)至少隨機(jī)抽取一只體重接近平均體重的雞，性別比例一致，剖檢取心、肝、脾、肺、腎等臟器稱重，并計(jì)算各器官與體重的比值；
c）組織病理學(xué)檢查：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)多倍劑量組及尸檢異常動(dòng)物的主要器官進(jìn)行系統(tǒng)的組織病理學(xué)檢查，詳細(xì)檢查的器官和組織包括：心、肝、脾、肺、腎、胸腺、胰腺、胃、十二指腸、回腸、直腸、骨髓等組織；
d）其他特異性觀測(cè)指標(biāo)：根據(jù)受試物的作用特點(diǎn)和用途，增加相應(yīng)的特異性觀測(cè)指標(biāo)和敏感性功能指標(biāo)。
5.1.8 方案確認(rèn)
試驗(yàn)設(shè)計(jì)完成后，形成書面試驗(yàn)方案，且應(yīng)經(jīng)試驗(yàn)負(fù)責(zé)人簽字確認(rèn)。
5.2 飼糧配置
5.2.1 選擇符合要求的飼料原料和飼料添加劑，飼料原料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合GB 13078規(guī)定。按照試驗(yàn)方案確定的配方和工藝，進(jìn)行飼糧配制。飼糧在配制、貯運(yùn)過程中避免受到污染。
5.2.2 根據(jù)受試物特性及使用方法確定飼糧加工方法、飼糧類型、粒度等。各處理間試驗(yàn)因子以外的其他因素，如：料型、粒度、加工方法等，應(yīng)保持一致。
5.2.3 應(yīng)對(duì)飼糧營養(yǎng)成分含量進(jìn)行實(shí)測(cè)，證實(shí)所配制的飼糧滿足配方設(shè)計(jì)的要求。
5.3 試驗(yàn)實(shí)施
5.3.1 肉雞飼養(yǎng)
5.3.1.1 肉雞飼養(yǎng)開始前，檢查、安裝和調(diào)試飼養(yǎng)設(shè)施及設(shè)備，確保設(shè)施及設(shè)備性能完好。使用前1周對(duì)飼養(yǎng)設(shè)備設(shè)施及圈舍進(jìn)行清理、消毒。
5.3.1.2 按照NY/T 388和/或相應(yīng)品種飼養(yǎng)管理手冊(cè)設(shè)置雞舍溫度、濕度、風(fēng)速、照度等環(huán)境參數(shù)；如試驗(yàn)?zāi)康挠刑厥庖螅葱枨笤O(shè)定。當(dāng)環(huán)境參數(shù)出現(xiàn)空間分布不均勻時(shí)，根據(jù)差異進(jìn)行隨機(jī)區(qū)組安排。
5.3.1.3 根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康倪x擇適宜的飼養(yǎng)方式，并根據(jù)肉雞品種、氣候溫濕度、雞舍通風(fēng)和降溫條件等確定適宜的飼養(yǎng)密度。
5.3.1.4 按照試驗(yàn)方案確定的肉雞品種和數(shù)量引進(jìn)試驗(yàn)動(dòng)物，試驗(yàn)開始時(shí)，組間初始體重相近、性別比例相同。
5.3.1.5 按試驗(yàn)方案對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行免疫，免疫措施應(yīng)不干擾受試物的作用模式。
5.3.1.6 不同處理間試驗(yàn)雞的飼養(yǎng)方式、飼養(yǎng)管理、免疫程序保持一致。
5.3.1.7 飼養(yǎng)試驗(yàn)用雞實(shí)行全進(jìn)全出管理，試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)雞舍實(shí)施徹底清洗、消毒。
5.3.2 臨床觀察
試驗(yàn)期內(nèi)每天觀察試驗(yàn)動(dòng)物臨床表現(xiàn)、采食和飲水情況，記錄病死動(dòng)物等不良反應(yīng)情況。
5.3.3 指標(biāo)檢測(cè)
5.3.3.1 生產(chǎn)性能測(cè)定按照5.1.7.2進(jìn)行。
5.3.3.2 血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)按照5.1.7.3進(jìn)行。
5.3.3.3 組織病理學(xué)檢查按照5.1.7.4進(jìn)行。
5.4 數(shù)據(jù)采集
5.4.1 采集飼養(yǎng)試驗(yàn)過程中所有原始記錄和數(shù)據(jù)，并根據(jù)相關(guān)要求對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相應(yīng)計(jì)算。
5.4.2 在適宜的時(shí)間內(nèi)完成異特性指標(biāo)樣本的檢測(cè)，并采集所有檢測(cè)數(shù)據(jù)。
5.5 統(tǒng)計(jì)分析
5.5.1 根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以重復(fù)為單位，采用公認(rèn)的、適宜的方法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。在統(tǒng)計(jì)分析前，需對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行是否符合正態(tài)分布的檢驗(yàn)，如果不符合正態(tài)分布，應(yīng)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)轉(zhuǎn)換達(dá)到正態(tài)分布。計(jì)算顯著性差異水平。
5.5.2 當(dāng)顯著性差異水平P＜0.05時(shí)，判定為差異顯著。
5.6 試驗(yàn)報(bào)告
5.6.1 試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)提供試驗(yàn)獲取的所有數(shù)據(jù)，包括所有試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)重復(fù)。未納入統(tǒng)計(jì)分析的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)丟失而無法評(píng)價(jià)的情況也應(yīng)報(bào)告，并說明在各組別中的分布情況。
5.6.2 試驗(yàn)報(bào)告正文至少應(yīng)包括：
a）試驗(yàn)名稱；
b）摘要；
c）試驗(yàn)?zāi)康模?/div>
d）受試物；
e）試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)；
f）試驗(yàn)材料和方法；
g）結(jié)果與分析；
h）結(jié)論：針對(duì)受試物的安全性評(píng)價(jià)結(jié)果給出判定；
i）原始數(shù)據(jù)及相關(guān)的圖表和照片；未納入統(tǒng)計(jì)分析的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)丟失而無法評(píng)價(jià)的情況應(yīng)具體說明；
j）參考文獻(xiàn)。
5.6.3 應(yīng)對(duì)試驗(yàn)報(bào)告每頁進(jìn)行編碼，格式為“第 頁，共 頁”，并加蓋騎縫章，確保報(bào)告的完整性。
6 資料存檔
試驗(yàn)完成后，試驗(yàn)機(jī)構(gòu)將試驗(yàn)方案、試驗(yàn)報(bào)告（包括階段性報(bào)告和最終報(bào)告）、原始記錄、圖表和照片、受試物樣品及其檢測(cè)報(bào)告等原始資料存檔。
本標(biāo)準(zhǔn)由國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局、國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)于2021年11月26日發(fā)布，2022年6月1日實(shí)施。
版權(quán)聲明：
1. 轉(zhuǎn)載本網(wǎng)內(nèi)容，請(qǐng)注明來源“中國肉類機(jī)械網(wǎng)”，或與本網(wǎng)聯(lián)系，違者將追究法律責(zé)任。
2.本網(wǎng)轉(zhuǎn)載刊登的文章以信息傳播為目的，僅代表作者個(gè)人觀點(diǎn)，版權(quán)由原作者或供稿方所擁有，并不構(gòu)成投資建議，據(jù)此操作，風(fēng)險(xiǎn)自擔(dān)。
3. 如果轉(zhuǎn)載文章涉及您的合法權(quán)益和版權(quán)問題，或者轉(zhuǎn)載出處出現(xiàn)錯(cuò)誤，請(qǐng)及時(shí)與本網(wǎng)聯(lián)系進(jìn)行刪除。
4. 友情提醒：網(wǎng)上交易有風(fēng)險(xiǎn),請(qǐng)買賣雙方謹(jǐn)慎交易,謹(jǐn)防上當(dāng)受騙！
5. 投稿與合作熱線：010-88133989， E-mail：mpmpc@126.com
